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Obtenção de uma linha marcadora com GUS/GFP para a AGP21
Tutor/Responsável: SÍLVIA VIEIRA DE ALMEIDA COIMBRA
Instituição: FACULDADE DE CIÊNCIAS DA UNIVERSIDADE DO PORTO (FCUP)
Local: Lab 2.60 http://www.fc.up.pt/agplab/
Área: BIOLOGIA DA REPRODUÇÃO
Ano Lectivo: 2017/2018
Duração: 6 meses
Data início: 2018-02-03
Data final: 2018-07-31
Vagas: 1
Podem candidatar-se: L :: Biologia (2º Ano) (3º Ano)
PERFIL DE COMPETÊNCIAS
Noções básicas de biologia das plantas, biologia celular e molecular.

PLANO DE ESTÁGIO
A AGP21 pertence a uma grande família de proteínas, as proteínas arabinogalactânicas (AGPs). De acordo com a base de dados TAIR (The Arabidopsis Information Resource) e BAR (The Bio-Analytic Resource for Plant Biology), esta AGP é expressa nos tecidos reprodutivos masculinos e femininos e durante o desenvolvimento embrionário, estando relacionada, consequentemente, com a produção de sementes em Arabidopsis thaliana. Pretende-se com este estágio obter um constructo que permita a localização desta AGP em plantas de Arabidopsis thaliana. O(a) aluno(a) terá a oportunidade de se familiarizar com as seguintes técnicas:

- extração de DNA genómico em plantas;
- utilização de plataformas bioinformáticas disponíveis on-line para análise in silico;
- desenho de primers;
- amplificação de DNA por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR);
- electroforese de DNA;
- extração e purificação de DNA de gel de agarose;
- clonagem e produção de vectores de entrada e vectores de destino;
- preparação de DNA plasmídico;
- cultura de bactérias (E. coli e Agrobacterium tumefaciens);
- preparação de células competentes;
- transformação de células competentes.

O constructo obtido através destas técnicas será utilizado para transformar plantas de Arabidopsis, variedade selvagem. As plantas serão depois selecionadas de acordo com o gene de resistência que utilizarmos (canamicina, BASTA, etc). Pretende-se depois dar continuidade a este trabalho para identificar a expressão da linha marcadora com GUS/GFP da AGP21, nos respetivos tecidos reprodutivos e ao longo do desenvolvimento das sementes de Arabidopsis thaliana.

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